紫外分光光度計的波長范圍:
(1)200~400nm的紫外光區,(2)400~760nm的可見光區, (3)2.5~25μm(按波數計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區。
紫外分光光度計的檢測原理:
當一束強度為I0的單色光垂直照射某物質的溶液后,由于一部分光被體系吸收,因此透射光的強度降至I,則溶液的透光率T為:
根據朗伯(Lambert)-比爾(Beer)定律:
A=abc
式中A為吸光度,b為溶液層厚度(cm),c為溶液的濃度(g/dm^3), a為吸光系數。其中吸光系數 與溶液的本性、溫度以及波長等因素有關。溶液中其他組分(如溶劑等)對光的吸收可用空白液扣除。
由上式可知,當溶液層厚度b和吸光系數a固定時,吸光度A與溶液的濃度成線性關系。在定量分析時,首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況(吸收光譜),從中確定zui大吸收波長 ,然后以此波長 的光為光源,測定一系列已知濃度c溶液的吸光度A,作出A~c工作曲線。在分析未知溶液時,根據測量的吸光度A,查工作曲線即可確定出相應的濃度。這便是分光光度法測量濃度的基本原理。
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